一、檢測目的
- 反興奮劑監管:確保體育賽事公平性,檢測運動員是否違規使用美睪酮。
- 臨床監測:診斷患者是否因濫用導致健康問題(如肝功能異常)。
- 法醫學調查:在藥物濫用案件或猝死案例中追溯原因。
二、樣本類型
- 尿液:最常用樣本,因美睪酮代謝物可在尿液中存留數日至數周。
- 血液:用于檢測原型藥物,窗口期較短(數小時至2天)。
- 唾液/毛發:較少用,適用于特殊情況(如實時監測或追溯長期使用)。
三、檢測方法
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- 用途:快速初篩,通過抗體-抗原反應檢測類固醇。
- 局限:可能受交叉反應干擾(如其他類固醇),需進一步確認。
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- 優勢:高靈敏度與特異性,可分離并鑒定代謝物。
- 步驟:樣本衍生化后分析,用于確認陽性結果。
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- 應用:直接檢測原型藥物及代謝物,無需復雜前處理,適合高通量檢測。
- 進展:已成為主流技術,尤其對極性代謝物靈敏度更高。
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- 原理:區分內源性睪酮(天然同位素組成)與外源性美睪酮(人工合成同位素特征)。
- 場景:用于質疑T/E比值異常的案例。
四、檢測指標
- 原型藥物:直接檢測美睪酮,窗口期短(用藥后24-48小時)。
- 代謝產物:
- 17α-甲基代謝物:主要代謝標志物,尿液中存留較久。
- 羥基化/氧化產物:需結合代謝譜分析。
- 生物標志物比值:
- 睪酮/表睪酮(T/E):正常值≤4:1,使用外源性類固醇可能導致比值升高。
- 碳同位素比值(δ13C):通過IRMS分析,確認是否偏離天然范圍。
五、檢測流程
- 樣本采集:標準化操作避免污染(如使用密封容器、記錄鏈)。
- 初篩:免疫分析法快速篩選疑似陽性樣本。
- 確認檢測:GC-MS或LC-MS/MS定量分析,必要時聯合IRMS驗證。
- 結果報告:依據閾值(如WADA規定)判定是否為陽性,并復核流程確保準確性。
六、挑戰與干擾
- 代謝個體差異:年齡、性別、肝功能影響代謝速率,可能造成假陰性。
- 交叉反應:某些藥物(如睪酮替代療法)可能干擾免疫分析法。
- 樣本 adulteration:摻雜酶或化學物質破壞目標物,需檢測樣本完整性(如pH值、比重)。
- 檢測窗口限制:美睪酮半衰期約6-8小時,單次用藥后尿檢窗口約7-10天,但長期使用可能延長至數月。
七、法規與標準
- WADA禁用清單:美睪酮屬S1類(合成代謝劑),全年禁賽物質。
- 閾值要求:
- 尿液中睪酮/表睪酮比值>4:1需進一步調查。
- IRMS確認δ13C值≤-28‰提示外源性來源。
- 實驗室認證:需通過ISO 17025或WADA認證,確保檢測合規性。
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