多不飽和脂肪酸檢測：核心項目與方法解析

一、檢測項目的分類與意義

1. • 常見目標物：EPA（二十碳五烯酸）、DHA（二十二碳六烯酸）、ARA（花生四烯酸）、α-亞麻酸（ALA）、亞油酸（LA）等。
   • 意義：評估特定產(chǎn)品的營養(yǎng)價值（如嬰幼兒配方奶粉中的DHA含量）；研究膳食補充劑或藥物中活性成分的劑量。
2. • 包括Omega-3、Omega-6總含量及比例分析（如Omega-3/Omega-6比值）。
   • 應(yīng)用場景：食品標簽合規(guī)性檢測（如功能性食品宣稱“高Omega-3”）；評估膳食結(jié)構(gòu)對慢性病的影響。
3. • 目標物：過氧化值（POV）、硫代巴比妥酸反應(yīng)物（TBARS）及特定氧化產(chǎn)物（如4-羥基壬烯酸）。
   • 意義：監(jiān)控油脂貨架期安全性，避免氧化酸敗導(dǎo)致健康風(fēng)險。
4. • 指標：血漿磷脂中的PUFAs組成、紅細胞膜脂肪酸譜。
   • 應(yīng)用：診斷必需脂肪酸缺乏癥、評估心血管疾病風(fēng)險（如EPA/DHA含量與冠心病關(guān)聯(lián)性）。

二、核心檢測技術(shù)

1. • 原理：脂肪酸甲酯化后，經(jīng)氣相色譜柱分離，火焰離子化檢測器（FID）定量。
   • 優(yōu)勢：高分辨率、成本低，適用于常規(guī)檢測（如食品中脂肪酸分析）。
   • 局限：需衍生化處理，無法直接檢測非揮發(fā)性氧化產(chǎn)物。
2. • 應(yīng)用：精確鑒定復(fù)雜樣品中的微量脂肪酸（如血漿樣本），區(qū)分同分異構(gòu)體。
   • 特點：高靈敏度，可結(jié)合同位素內(nèi)標法提高準確性。
3. • 適用場景：檢測氧化產(chǎn)物或未衍生化脂肪酸（如游離脂肪酸）。
   • 優(yōu)勢：避免高溫導(dǎo)致的降解，適合熱不穩(wěn)定成分分析。
4. • 用途：快速篩查大批量樣品（如食用油中總PUFAs含量）。
   • 局限：需建立模型，準確性依賴于校準數(shù)據(jù)集。

三、樣品前處理關(guān)鍵步驟

1. • 方法：Folch法（氯仿-甲醇體系）或改良的Bligh-Dyer法。
   • 注意事項：加入抗氧化劑（如BHT）防止氧化，低溫操作。
2. • 步驟：堿性條件水解甘油酯，酸性甲醇酯化為脂肪酸甲酯（FAMEs）。
   • 關(guān)鍵試劑：三氟化硼-甲醇或硫酸-甲醇體系。
3. • 固相萃取（SPE）去除雜質(zhì)，適用于生物樣本（如血清、組織）。

四、質(zhì)量控制與數(shù)據(jù)分析

• 標準品選擇：使用認證的FAMEs混合標準品，涵蓋C14-C24鏈長范圍。
• 內(nèi)標法：添加已知量的C17:0或C19:0甲酯作為內(nèi)標，校正提取與衍生化損失。
• 數(shù)據(jù)表達：以“mg/g樣品”或“占總脂肪酸百分比”呈現(xiàn)，需注明檢測限（LOD）與定量限（LOQ）。

五、應(yīng)用與挑戰(zhàn)

• 食品工業(yè)：確保魚油、乳制品等產(chǎn)品的標簽真實性（如歐盟法規(guī)No 116/2010）。
• 臨床診斷：通過紅細胞膜脂肪酸譜評估代謝綜合征風(fēng)險。
• 挑戰(zhàn)：PUFAs易氧化，需嚴格控制前處理條件；復(fù)雜基質(zhì)（如母乳）干擾分析，需優(yōu)化分離方法。

六、未來展望