一、檢測原理
二、核心檢測項目
1. 微生物鑒定與分型
- 尿素瓊脂培養(yǎng)基法: 培養(yǎng)基含尿素和酚紅指示劑。接種菌落后,產(chǎn)脲酶菌株分解尿素釋放氨,pH升高,培養(yǎng)基由黃色變?yōu)樘壹t色(陽性)。
- 快速試紙法: 試紙浸漬尿素和pH指示劑,菌液涂抹后,顏色變化(如紅→粉紅)提示陽性。
- 臨床分離幽門螺桿菌(胃活檢樣本)。
- 區(qū)分腸桿菌科細菌(如變形桿菌與大腸桿菌)。
2. 臨床幽門螺桿菌感染診斷
- 尿素呼氣試驗(UBT): 患者口服13C13C或14C14C標記的尿素膠囊,若存在幽門螺桿菌,脲酶分解尿素生成標記CO?,通過質(zhì)譜儀或閃爍計數(shù)器檢測呼氣樣本中的同位素含量。
3. 農(nóng)業(yè)與土壤酶活性評估
- 基質(zhì)顯色法: 土壤樣本與尿素溶液孵育,加入奈氏試劑(檢測NH?),溶液變黃至棕色為陽性,活性高低通過顏色深淺定性判斷。 意義:高脲酶活性可能導(dǎo)致尿素過快分解,增加氮素流失風(fēng)險。
4. 食品微生物安全檢測
- 選擇性培養(yǎng)基法: 食品樣本接種于含尿素的顯色培養(yǎng)基,陽性結(jié)果提示潛在污染。
三、實驗步驟(以微生物鑒定為例)
- 樣本處理:純化待測菌落。
- 接種:劃線接種于尿素瓊脂斜面。
- 孵育:35°C培養(yǎng)18-24小時。
- 觀察:培養(yǎng)基變紅為陽性,不變色為陰性。
四、結(jié)果判讀與注意事項
- 假陽性:可能由培養(yǎng)基污染或過度孵育導(dǎo)致。
- 假陰性:溫度不適宜或菌量不足。
- 質(zhì)量控制:同步使用已知陽性和陰性菌株對照。
五、應(yīng)用領(lǐng)域擴展
- 環(huán)境監(jiān)測:評估水體中微生物活性。
- 工業(yè)酶生產(chǎn):篩選高產(chǎn)脲酶菌株。
六、總結(jié)
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