黃曲霉毒素B族檢測技術綜述

一、檢測項目的核心內容

1. • AFB1：毒性最強，主要檢測對象。
   • AFB2：毒性次之，常與AFB1共存。
   • 總B族毒素：AFB1與AFB2的總量（需進行衍生化處理以提高檢測靈敏度）。
2. • 安全評估：評估食品、飼料中黃曲霉毒素是否超出國家標準或國際限量。
   • 污染溯源：追蹤污染來源，指導農業生產和儲存管理。
   • 法規合規：滿足進出口貿易中的檢測要求（如歐盟、美國FDA標準）。
3. • 中國標準（GB 2761-2017）：
     • 玉米、花生及其制品：AFB1≤20 μg/kg；總B族（AFB1+AFB2）≤20 μg/kg。
     • 嬰幼兒配方食品：AFB1≤0.5 μg/kg。
   • 歐盟標準（EC 1881/2006）：
     • 直接食用的花生：AFB1≤8 μg/kg，總B族≤15 μg/kg。

二、檢測方法及技術選擇

1. • 免疫層析試紙法（膠體金法）：
     • 原理：抗原-抗體特異性結合，肉眼觀察顯色結果。
     • 特點：快速（10-15分鐘）、便攜，適用于現場初篩。
     • 缺點：半定量，假陽性率高，需實驗室確證。
   • 酶聯免疫法（ELISA）：
     • 原理：酶標記抗體與毒素結合，通過吸光度定量。
     • 靈敏度：可達0.1 μg/kg。
     • 適用范圍：大批量樣品的快速定量分析。
2. • 高效液相色譜法（HPLC）：
     • 搭配熒光檢測器（FLD）：需柱前/柱后衍生化（如碘、溴衍生）增強信號。
     • 檢測限：AFB1可達0.01 μg/kg。
   • 液相色譜-串聯質譜法（LC-MS/MS）：
     • 原理：多反應監測（MRM）模式，高特異性、高靈敏度。
     • 優勢：可同時檢測多種毒素，無需衍生化。
     • 檢測限：可達0.001 μg/kg（超痕量分析）。

三、樣品前處理關鍵步驟

1. • 代表性采樣：根據GB 5009.22標準，對不均勻樣品（如花生）進行多點取樣。
   • 避光保存：黃曲霉毒素遇光易降解，需低溫（4℃）避光儲存。
2. • 提取溶劑：甲醇-水（70:30）、乙腈-水（84:16）等。
   • 凈化技術：
     • 免疫親和柱（IAC）：特異性吸附黃曲霉毒素，去除雜質。
     • 多功能凈化柱（MycoSep®）：基于分子篩和吸附劑去除干擾物。

四、檢測中的質量控制

1. • 每批次樣品需設置空白對照，排除基質干擾。
   • 加標回收率應控制在70%-120%（依據GB 5009.22要求）。
2. • 使用有證標準物質（如Sigma-Aldrich）。
   • 校準曲線線性范圍需覆蓋預期濃度（R²≥0.99）。

五、檢測挑戰與解決方案

1. • 復雜樣品（如香辛料、中藥）需優化提取方案，結合QuEChERS法凈化。
2. • 采用LC-MS/MS結合同位素內標法（如¹³C標記AFB1）提高準確性。
3. • 初篩陽性樣品需通過儀器法確證，避免誤判。

六、應用領域

1. 食品行業：糧食加工、食用油、乳制品等。
2. 飼料安全：防止毒素通過動物產品進入食物鏈。
3. 中藥材監控：易霉變藥材（如枸杞、薏苡仁）的質控。