一、檢測項目概述

1. • 評估受試物直接接觸眼組織（角膜、結膜、虹膜）后的急性刺激性或腐蝕性。
   • 預測人體暴露后可能引發的眼部炎癥、紅腫、潰瘍等不良反應。
2. • 化學品：工業原料、農藥、溶劑等。
   • 日化用品：洗發水、染發劑、護膚品等。
   • 醫療器械：接觸眼部的液體或材料（如隱形眼鏡護理液）。
   • 藥品：滴眼液、眼膏等局部用藥的輔料或活性成分。
3. • OECD TG 405（經濟合作與發展組織化學品測試指南）。
   • ISO 10993-10（醫療器械生物學評價第10部分：刺激與皮膚致敏試驗）。
   • 中國《化妝品安全技術規范》（2021年版）中的急性眼刺激/腐蝕性試驗方法。

二、主要檢測項目與方法

1. 體內試驗（傳統動物試驗）

• 原理：將受試物滴入實驗動物（通常為家兔）結膜囊，觀察72小時至21天的眼部反應。
• 檢測指標：
  • 角膜損傷：渾濁度、潰瘍面積。
  • 結膜炎癥：充血、水腫、分泌物。
  • 虹膜反應：充血、腫脹、瞳孔反射異常。
• 評分標準：按Draize評分系統（0~110分）量化損傷程度（表1）。

• 減少動物用量：采用階梯式測試策略，優先通過體外篩選減少動物實驗。

2. 體外替代試驗（替代動物試驗）

• 重建角膜模型試驗（如EpiOcular™、SkinEthic™）：
  • 使用人工培養的角膜上皮細胞評估細胞毒性（MTT法檢測細胞存活率）。
• 雞胚絨毛尿囊膜試驗（HET-CAM）：
  • 觀察受試物對血管的刺激反應（出血、凝血、血管溶解）。
• 細胞毒性試驗（如中性紅攝取法）：
  • 通過細胞膜通透性變化評估刺激性。
• 離體動物眼球試驗：
  • 使用屠宰場來源的牛、豬眼球進行短期暴露測試。

三、試驗流程與關鍵步驟

1. • 液體直接測試，固體需溶解或研磨成細粉（粒徑≤100μm），pH值需調整至接近眼表生理環境（pH 6.5~8.5）。
2. • 劑量選擇：單次給予0.1mL液體或100mg固體。
   • 觀察時間點：1小時、24小時、48小時、72小時及恢復期（7~21天）。
   • 對照設置：陰性對照（生理鹽水）、陽性對照（1%十二烷基硫酸鈉）。
3. • 重建角膜模型：暴露時間通常為1小時，檢測細胞活性（IC50值）。
   • HET-CAM試驗：評分標準基于血管損傷程度（0~21分）。

四、結果判定與分類

1. • 無刺激性：Draize總分≤1（72小時）。
   • 輕刺激性：總分2~15。
   • 中刺激性：總分16~25。
   • 強刺激性/腐蝕性：總分≥25或不可逆損傷（如角膜穿孔）。
2. • 重建角膜模型：細胞存活率≥50%判定為無刺激性。
   • HET-CAM試驗：評分≥10分提示強刺激風險。

五、應用與報告輸出

1. • 受試物信息（理化性質、濃度）、試驗方法、觀察數據、評分結果及。
   • 對產品標簽的警示建議（如“避免接觸眼睛”）。
2. • 化妝品備案：中國《化妝品注冊備案資料管理規定》要求提供眼刺激數據。
   • 化學品注冊（如REACH法規）：歐盟要求對噸位≥1噸/年的物質進行眼刺激評估。

六、檢測技術的新趨勢

1. 器官芯片技術：模擬人眼角膜微生理環境，結合流體剪切力與細胞共培養。
2. 計算機預測模型（QSAR）：基于化合物結構預測刺激性，減少實驗依賴。

七、試驗的局限性

• 種屬差異：兔眼與人眼在淚液分泌、角膜厚度等方面存在差異。
• 體外模型局限性：無法完全模擬神經炎癥或免疫反應。

結語