溶血性鏈球菌檢驗檢測：核心檢測項目詳解

一、檢測項目的分類及原理

1. 傳統培養法

• 樣本類型：咽拭子、傷口分泌物、血液、腦脊液（依感染部位而定）。
• 培養基選擇：
  • 血瓊脂平板：觀察溶血現象（α/β/γ溶血）。β溶血（完全溶血）是A群鏈球菌的特征。
  • 選擇性培養基（如哥倫比亞CNA血瓊脂）：抑制革蘭氏陰性菌生長，提高分離率。
• 培養條件：3537℃、5% CO?環境培養2448小時。

2. 生化鑒定法

• 觸酶試驗：鏈球菌觸酶陰性（區別于葡萄球菌）。
• Lancefield分群：通過乳膠凝集試驗檢測細胞壁多糖抗原（如A群抗血清凝集）。
• 生化反應：
  • PYR試驗（吡咯烷酮芳基酰胺酶）：A群鏈球菌陽性。
  • CAMP試驗：B群鏈球菌呈協同溶血。
  • 膽汁七葉苷水解：用于鑒別D群鏈球菌。

3. 分子生物學檢測

• PCR技術：
  • 靶基因：如A群鏈球菌的 speB基因 或 emm基因，B群鏈球菌的 cfb基因。
  • 多重PCR：可同時檢測多種致病基因。
• 實時熒光定量PCR（qPCR）：定量分析，靈敏度可達10²~10³ CFU/mL。
• 基因測序：用于毒力基因分型或耐藥性分析（如紅霉素耐藥基因erm）。

4. 免疫學檢測

• 膠體金試紙：檢測A群鏈球菌抗原，15分鐘內出結果。
• ELISA法：定量檢測血清中抗鏈球菌溶血素O（ASO）抗體，輔助診斷風濕熱。

二、樣本采集與處理要點

• 臨床樣本：
  • 咽拭子：擦拭扁桃體區域，避免唾液污染。
  • 血液/腦脊液：無菌操作，立即送檢。
• 食品樣本（如乳制品）：按ISO標準進行均質化處理，增菌后接種培養基。
• 保存條件：2~8℃冷藏，4小時內送檢；延遲送檢需使用轉運培養基。

三、檢測結果解讀與臨床意義

四、特殊場景下的檢測策略

1. 新生兒GBS篩查：
   • 孕晚期（35~37周）陰道/直腸拭子，采用qPCR或富集培養法。
2. 侵襲性感染診斷（如壞死性筋膜炎）：
   • 血液PCR聯合培養，提高檢出率。
3. 食品安全監測：
   • 采用ISO 9232標準，檢測食品中的β-溶血鏈球菌限值。

五、技術進展與未來方向

• 微流控芯片技術：整合核酸提取、擴增及檢測，實現“樣本進-結果出”。
• MALDI-TOF MS：通過蛋白指紋圖譜快速鑒定菌種，耗時僅需分鐘。
• CRISPR-Cas系統：開發高特異性分子診斷工具，如SHERLOCK技術。

結語