- 生產監控:確保原料及成品符合微生物安全標準;
- 保質期評估:預測高糖/高鹽食品的貨架期穩定性;
- 合規性檢測:滿足GB 4789.15-2016《食品微生物學檢驗 酵母和霉菌計數》等法規要求。
-
- 高糖/高鹽樣品(如蜂蜜、醬油):需用無菌蒸餾水梯度稀釋(1:10至1:1000),降低滲透壓以恢復酵母活性。
- 粘稠樣品(如果醬):加入0.1%無菌蛋白胨水,均質后過濾去除顆粒物。
-
- 孟加拉紅嗜滲培養基(Rose Bengal Osmophilic Agar):含50%葡萄糖或40%蔗糖,抑制細菌及其他非嗜滲酵母生長。
- 改良MYP培養基:添加氯霉素(0.1g/L)抑制革蘭氏陰性菌。
-
- 接種后置于25-28℃培養5-7天,高濕度環境下避免培養基脫水。
- 每日觀察菌落形態:嗜滲酵母通常形成濕潤、乳白色或粉紅色菌落(直徑1-3mm)。
-
- 傾注平板法:適用于液態樣品,檢測限10² CFU/g;
- 涂布平板法:用于高濃度樣品,需預稀釋至30-300 CFU/平板;
- 膜過濾法(低菌量樣品):通過0.45μm濾膜富集微生物,轉移至培養基培養。
-
- PCR擴增:針對26S rDNA D1/D2區或ITS區域設計特異性引物;
- MALDI-TOF MS:蛋白質指紋圖譜快速鑒定種屬。
- 培養基驗證:每批次需用標準菌株(如Zygosaccharomyces rouxii ATCC 42981)驗證選擇性和靈敏度;
- 避免交叉污染:高糖樣品易吸潮,需在干燥環境中快速操作;
- 結果判讀:區分嗜滲酵母與耐高滲霉菌(如灰綠曲霉),后者菌落呈絨毛狀。
- 快速檢測試劑盒:基于ATP生物發光法,3小時內完成定量檢測;
- 微流控芯片技術:集成樣品預處理與檢測,適用于現場快速篩查;
- 宏基因組測序:用于復雜樣品中嗜滲酵母菌群多樣性分析。
食品類別 | 中國標準限值(CFU/g) | 國際食品法典(CAC)限值 |
---|---|---|
蜂蜜 | ≤100 | ≤500 |
濃縮果汁 | ≤10³ | ≤2×10³ |
果醬類 | ≤5×10² | ≤1×10³ |
- 污染源:原料蜜未經驗收直接灌裝,野蜂攜帶耐滲菌株;
- 糾正措施:增加60℃巴氏滅菌(30分鐘),包裝前紫外線殺菌。
- GB 4789.15-2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 酵母和霉菌計數
- International Commission on Food Mycology (ICFM) Guidelines (2021)
- Journal of Food Protection, Vol.85, "Advances in Osmophilic Microorganism Detection"
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