-
- PRSV-CP基因：大多數商業化轉基因木瓜攜帶PRSV病毒的外殼蛋白基因，這是特異性靶標。
- 標記基因：如新霉素磷酸轉移酶基因（nptII）、潮霉素抗性基因（hpt），用于篩選轉化細胞。
-
- 啟動子：檢測轉基因常用啟動子，如花椰菜花葉病毒35S啟動子（CaMV 35S）或木薯葉脈花葉病毒啟動子（CsVMV）。
- 終止子：如胭脂堿合成酶終止子（NOS）。
-
- 定性PCR：通過特異性引物擴增目標基因（如CaMV 35S、NOS、PRSV-CP），結合瓊脂糖凝膠電泳或毛細管電泳判定結果。
- 定量實時熒光PCR（qPCR）：適用于定量檢測，靈敏度可達0.1%轉基因成分。
- 多重PCR：同時檢測多個靶標基因，提升效率。
-
- ELISA：通過抗體檢測外源蛋白（如CP蛋白），但易受加工過程中蛋白質變性的影響。
- 試紙條快速檢測：適用于田間初篩，10分鐘內出結果。
-
- 問題：木瓜富含多糖、多酚及RNA酶，易導致DNA提取純度低。
- 方案：優化CTAB法，添加PVP-40或β-巰基乙醇去除多酚；使用硅膠膜吸附柱純化DNA。
-
- 問題：高溫加工（如果醬、干燥片）導致DNA片段化。
- 方案：設計短片段擴增引物（<100 bp），或采用環介導等溫擴增（LAMP）技術。
-
- 問題：部分轉基因木瓜可能攜帶未申報的基因改造事件。
- 方案：結合宏基因組學篩查未知序列，或通過微滴式數字PCR（ddPCR）提高檢測通量。
-
- 依據（EC）No 1829/2003法規，轉基因木瓜需強制標識，檢測限為0.9%（按成分計）。
- 參考標準：ENGL檢測方法指南。
-
- 《農業轉基因生物安全管理條例》要求進口木瓜提供轉基因安全證書，檢測依據GB 19495-2004（轉基因產品檢測標準）。
-
- 未強制標識，但FDA要求上市前完成安全性評估。檢測多遵循ISO 21569/21570標準。
- 采樣：按GB/T 8855規定抽取木瓜果肉、種子或加工品樣本。
- DNA提取：采用改良CTAB法或商業化試劑盒（如DNeasy Plant Pro Kit）。
- PCR預實驗：擴增內源基因（如木瓜CHY基因）驗證DNA質量。
- 靶標檢測：
- 第一輪：篩查CaMV 35S、NOS等通用元件。
- 第二輪：檢測PRSV-CP、nptII等特異性基因。
- 第三輪（必要時）：品系特異性檢測。
- 結果判定：通過陽性對照和陰性對照確認擴增有效性。
-
- 保障消費者知情權與選擇權；
- 防止未批準的轉基因品系流入市場；
- 滿足跨境貿易中的合規性要求。
-
- CRISPR等新技術的檢測挑戰：基因編輯木瓜可能不含外源基因，需開發基于全基因組或脫靶效應的檢測方法。
- 便攜化設備：基于智能手機的qPCR儀或微流控芯片技術，實現現場快速檢測。
轉成精致網頁
上一篇：轉基因植物品系特異性檢測下一篇：無公害農產品 蕓苔屬類蔬菜檢測
材料實驗室
熱門檢測
推薦檢測
聯系電話
400-635-0567
掃一掃關注公眾號
