尿酸檢測(cè)試劑盒（尿酸酶法）技術(shù)說(shuō)明

一、檢測(cè)原理

1. 尿酸酶催化反應(yīng)：尿酸在尿酸酶作用下被氧化生成尿囊素、二氧化碳和過(guò)氧化氫（H?O?）。 反應(yīng)式： 尿酸+O2+H2O→尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2尿酸+O2?+H2?O尿酸酶?尿囊素+CO2?+H2?O2?
2. 過(guò)氧化物酶顯色反應(yīng)：H?O?在過(guò)氧化物酶（POD）催化下與4-氨基安替比林（4-AAP）和3,5-二氯-2-羥基苯磺酸（DHBS）反應(yīng)，生成紅色醌類化合物。 反應(yīng)式： H2O2+4-AAP+DHBS→POD紅色化合物+H2OH2?O2?+4-AAP+DHBSPOD?紅色化合物+H2?O
3. 比色測(cè)定：通過(guò)測(cè)定505-546 nm波長(zhǎng)處吸光度變化（ΔA），與尿酸濃度成正比。

二、檢測(cè)項(xiàng)目核心參數(shù)

1. 樣本類型

• 適用樣本：
  • 血清（推薦無(wú)溶血、無(wú)脂血樣本）
  • 血漿（肝素、EDTA抗凝）
  • 尿液（需酸化防腐處理，推薦24小時(shí)尿）
• 樣本處理要求：
  • 血清/血漿：離心后分離上清液，避免反復(fù)凍融。
  • 尿液：稀釋10-20倍后檢測(cè)（根據(jù)試劑盒說(shuō)明調(diào)整）。

2. 檢測(cè)范圍

• 線性范圍：
  • 血清/血漿：0.1-20 mg/dL（6-1193 μmol/L）
  • 尿液：0.5-100 mg/dL（需稀釋后檢測(cè)）
• 超限處理：
  • 高于線性范圍上限時(shí)，需用生理鹽水稀釋樣本后復(fù)測(cè)。

3. 性能指標(biāo)

4. 臨床應(yīng)用

• 主要適應(yīng)癥：
  • 痛風(fēng)：診斷及監(jiān)測(cè)高尿酸血癥。
  • 腎臟疾病：評(píng)估尿酸排泄功能（如尿尿酸檢測(cè)）。
  • 代謝綜合征：輔助診斷胰島素抵抗相關(guān)疾病。
  • 腫瘤溶解綜合征：監(jiān)測(cè)化療后尿酸水平。
• 參考范圍（成人）：
  • 血清/血漿：男性 3.4-7.0 mg/dL（202-416 μmol/L） 女性 2.4-6.0 mg/dL（143-357 μmol/L）
  • 24小時(shí)尿尿酸：250-750 mg/24h（常規(guī)飲食）

5. 操作步驟（簡(jiǎn)化流程）

1. 試劑配制：按說(shuō)明書復(fù)溶干粉試劑。
2. 加樣：
   • 樣本管：3 μL樣本 + 300 μL工作液。
   • 空白管：3 μL蒸餾水 + 300 μL工作液。
3. 孵育：37℃避光反應(yīng)5分鐘。
4. 讀數(shù)：在546 nm處測(cè)定吸光度（A），計(jì)算ΔA（ΔA = A樣本 - A空白）。
5. 結(jié)果計(jì)算： 尿酸濃度=Δ?樣本Δ?標(biāo)準(zhǔn)品×標(biāo)準(zhǔn)品濃度尿酸濃度=ΔA標(biāo)準(zhǔn)品?ΔA樣本??×標(biāo)準(zhǔn)品濃度

三、注意事項(xiàng)

1. 干擾因素：
   • 溶血（Hb＞5 g/L）、乳糜血（TG＞1000 mg/dL）可導(dǎo)致假性升高。
   • 維生素C（＞50 mg/dL）可能抑制顯色反應(yīng)，建議檢測(cè)前詢問(wèn)用藥史。
2. 試劑保存：
   • 未開封試劑2-8℃保存，有效期內(nèi)使用；開封后避免污染。
3. 質(zhì)量控制：
   • 每日檢測(cè)需包含高、低值質(zhì)控品，CV需符合實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)（≤5%）。

四、方法優(yōu)勢(shì)

1. 特異性高：尿酸酶僅作用于尿酸，不受其他嘌呤類物質(zhì)干擾。
2. 靈敏度強(qiáng)：可檢測(cè)低至0.05 mg/dL的尿酸濃度。
3. 快速簡(jiǎn)便：全程檢測(cè)時(shí)間＜10分鐘，適用于自動(dòng)化生化分析儀。

五、總結(jié)