紫外-可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)項(xiàng)目詳解

一、檢測(cè)項(xiàng)目分類(lèi)與典型應(yīng)用

• 活性成分含量測(cè)定 實(shí)例：對(duì)乙酰氨基酚片劑 在243 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，依據(jù)朗伯-比爾定律計(jì)算濃度，確保藥物符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。
• 溶出度測(cè)試 監(jiān)測(cè)固體制劑在模擬胃腸液中的釋放曲線(xiàn)，評(píng)估藥物生物利用度。

• 重金屬檢測(cè) 六價(jià)鉻（Cr(VI)）檢測(cè)：與二苯碳酰二肼顯色生成紫紅色絡(luò)合物，于540 nm定量，檢測(cè)限低至0.001 mg/L。
• 有機(jī)污染物分析 苯酚類(lèi)化合物：在270 nm處直接測(cè)定工業(yè)廢水中的苯酚含量，或通過(guò)衍生化提高靈敏度。

• 蛋白質(zhì)定量 Bradford法：考馬斯亮藍(lán)G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合，595 nm處吸光度變化與濃度正相關(guān)。
• 核酸濃度與純度評(píng)估 DNA/RNA在260 nm處吸收峰定量，A260/A280比值判斷純度（純DNA≈1.8，RNA≈2.0）。

• 食品添加劑檢測(cè) 亞硝酸鹽：酸性條件下與對(duì)氨基苯磺酸及萘乙二胺顯色，538 nm測(cè)定腌制食品中亞硝酸鹽殘留。
• 有害物質(zhì)篩查 黃曲霉毒素B1：經(jīng)衍生化后于365 nm檢測(cè)，滿(mǎn)足糧油產(chǎn)品安全標(biāo)準(zhǔn)。

• 半導(dǎo)體帶隙測(cè)定 通過(guò)吸收光譜外推法計(jì)算禁帶寬度（如TiO?納米材料約3.2 eV），指導(dǎo)光催化材料設(shè)計(jì)。
• 納米粒子表征 金納米顆粒表面等離子共振吸收峰（~520 nm）分析粒徑及分散性。

二、方法優(yōu)化關(guān)鍵因素

1. 波長(zhǎng)選擇 優(yōu)先選用目標(biāo)物最大吸收波長(zhǎng)（λ_max）以提高靈敏度，避免共存物質(zhì)干擾。
2. 顯色反應(yīng)增強(qiáng) 絡(luò)合劑（如1,10-菲啰啉測(cè)鐵）或酶催化反應(yīng)（如ELISA）可顯著提升檢測(cè)限。
3. 背景校正技術(shù) 使用雙光束分光光度計(jì)或空白試劑扣除基質(zhì)干擾。

三、優(yōu)勢(shì)與局限性

• 優(yōu)勢(shì)：快速、成本低、適用于大批量樣品；可聯(lián)用流動(dòng)注射、色譜技術(shù)擴(kuò)展應(yīng)用。
• 局限性：需透明均相溶液；高濃度時(shí)偏離比爾定律；特異性依賴(lài)選擇性顯色反應(yīng)。

四、