一、檢測項目概述

• 食品工業(yè)：飲料、乳制品、烘焙食品的營養(yǎng)標(biāo)簽制定。
• 藥品生產(chǎn)：糖漿、口服液等含糖制劑的質(zhì)控。
• 農(nóng)業(yè)生產(chǎn)：果蔬、蜂蜜的成熟度與品質(zhì)評價。
• 科研領(lǐng)域：發(fā)酵產(chǎn)物或生物反應(yīng)中糖代謝研究。

二、核心檢測方法

1. 斐林試劑法（Lane-Eynon法）

• 原理：還原糖在堿性條件下與斐林試劑反應(yīng)生成氧化亞銅沉淀，通過滴定法測定糖含量。
• 適用范圍：適用于高糖含量的液態(tài)樣品（如果汁、糖漿）。
• 特點：經(jīng)典方法，需嚴(yán)格控制加熱時間和溫度；操作復(fù)雜，但成本較低。

2. 3,5-二硝基水楊酸法（DNS法）

• 原理：還原糖與DNS試劑在沸水浴中反應(yīng)生成棕紅色氨基化合物，通過分光光度計測定吸光度值。
• 適用范圍：固體、液體樣品（如谷物、發(fā)酵液）。
• 特點：操作簡便、靈敏度高，可批量檢測；但對非還原糖需預(yù)先水解。

3. 高效液相色譜法（HPLC）

• 原理：利用色譜柱分離樣品中各糖類組分，通過示差折光檢測器或蒸發(fā)光散射檢測器定量分析。
• 適用范圍：復(fù)雜基質(zhì)樣品（如含多種糖類的保健食品）。
• 特點：高選擇性，可區(qū)分單糖、雙糖及多糖；設(shè)備昂貴，需專業(yè)人員操作。

4. 酶解法

• 原理：采用特定酶（如淀粉酶、蔗糖酶）將非還原糖水解為葡萄糖，再通過酶電極或比色法測定總糖。
• 適用范圍：含淀粉、蔗糖等需水解的樣品（如乳制品）。
• 特點：特異性強，干擾少；需優(yōu)化酶解條件（溫度、pH）。

三、檢測流程關(guān)鍵步驟

1. • 液體樣品：稀釋或離心去除雜質(zhì)。
   • 固體樣品：粉碎后用水或乙醇提取，過濾去除不溶物。
   • 注意：淀粉類樣品需酸水解（如鹽酸），蔗糖需酶解或酸解為還原糖。
2. • 配制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液梯度（如0.1-1.0 mg/mL），測量吸光度或滴定體積，建立濃度-信號線性關(guān)系。
3. • 控制反應(yīng)溫度、時間及試劑比例（如DNS法中沸水浴時間需精確至分鐘級）。
4. • 添加澄清劑（如中性乙酸鉛）去除蛋白質(zhì)、多酚等干擾成分。

四、質(zhì)量控制與結(jié)果驗證

• 內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：使用已知濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品進行平行實驗，回收率應(yīng)達95%~105%。
• 重復(fù)性測試：同一批次樣品至少重復(fù)測定3次，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）≤5%。
• 方法驗證：對比國標(biāo)（如GB 5009.7-2016）或國際標(biāo)準(zhǔn)（如AOAC方法）進行準(zhǔn)確性評估。

五、常見問題與解決方案

1. • 可能原因：樣品未完全水解或存在其他還原性物質(zhì)（如維生素C）。
   • 解決方案：延長水解時間，或加入過氧化氫消除干擾。
2. • 可能原因：斐林試劑失效或樣品濃度過低。
   • 解決方案：更新試劑，濃縮樣品后復(fù)測。
3. • 可能原因：色譜柱老化或流動相比例不當(dāng)。
   • 解決方案：更換色譜柱，優(yōu)化乙腈-水比例。

六、

• GB 5009.7-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中還原糖的測定》
• AOAC 925.35《總糖測定方法（斐林試劑法）》
• ISO 11292:1995《速溶咖啡中總糖的測定》