1. 傳統培養法

• 前增菌：樣本（如食品、環境拭子）加入無選擇性培養基（如FB1培養基），恢復受損菌活性（37℃，24-48h）。
• 選擇性增菌：轉種至含抗生素的選擇性培養基（如FB2培養基，抑制雜菌生長，37℃，24h）。
• 分離培養：劃線接種于顯色培養基（如CHROMagar™李斯特菌瓊脂），菌落呈藍綠色，周圍有白色暈圈（磷脂酶活性）；或牛津瓊脂（黑色菌落，因水解七葉苷）。
• 生化鑒定：過氧化氫酶試驗（陽性）、溶血試驗（羊血瓊脂β-溶血）、糖發酵試驗（鼠李糖、木糖利用差異）。
• 協同溶血試驗：與金黃色葡萄球菌共培養顯示“傘狀溶血”特征。

2. 分子生物學檢測

• 常規PCR：擴增目標基因后電泳分析（靈敏度約10³ CFU/g）。
• 實時熒光定量PCR（qPCR）：結合TaqMan探針或SYBR Green，定量檢測（靈敏度達10¹ CFU/g），可區分活/死菌（結合疊氮溴化乙錠預處理）。
• 多重PCR：同時檢測李斯特菌屬及單核細胞增生種（如靶向iap屬基因和hlyA種基因）。
• 環介導等溫擴增（LAMP）：恒溫快速檢測（1小時），肉眼觀察渾濁度或熒光信號，適用于現場篩查。
• 全基因組測序（WGS）：用于溯源分析及耐藥基因鑒定。

3. 免疫學檢測

• 酶聯免疫吸附試驗（ELISA）：商業化試劑盒（如VIDAS® LMO2）可半定量檢測，靈敏度約10? CFU/mL。
• 免疫磁珠分離（IMS）：用抗體包被磁珠富集細菌，提高后續檢測效率。
• 膠體金免疫層析試紙條：快速定性（15-20分鐘），適用于基層或現場初篩。

4. 快速自動化檢測系統

• 生物傳感器：如表面等離子體共振（SPR）、電化學傳感器，實時監測細菌-抗體結合信號。
• 基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜（MALDI-TOF MS）：通過蛋白質指紋圖譜快速鑒定純培養菌落（≤5分鐘）。
• 流式細胞術：結合熒光標記抗體，快速計數細菌。

1. • 重點食品：即食肉制品、乳酪、生鮮果蔬、即食海鮮。
   • 標準限量：多數國家規定即食食品中不得檢出（25g樣品中陰性）。
   • 企業自控：加工環境（如傳送帶、冷庫）的涂抹監測（每周采樣）。
2. • 樣本類型：血液、腦脊液、胎盤組織、新生兒拭子。
   • 危急病例：需同步分子檢測（如腦脊液PCR）以縮短診斷時間。
3. • 食品工廠排水系統、通風設備、冷鏈運輸環節的定期檢測。

1. 靈敏度與特異性：臨床樣本需高靈敏度（如qPCR），而環境篩查可采用快速試紙條。
2. 檢測時效：疫情暴發時優先分子法，常規監控可結合培養法確認。
3. 成本與設備：基層實驗室適合ELISA或LAMP，大型機構可選擇自動化平臺。
4. 法規要求：進出口食品需符合目的國標準（如美國FSIS要求培養法確認）。