一、檢測項目概述

1. • 標本類型：根據感染部位選擇樣本（如咽拭子、傷口分泌物、血液、腦脊液、陰道拭子等）。
   • 采集要求：無菌操作避免污染，咽拭子需深入咽后壁擦拭；B群鏈球菌篩查（孕婦）需采集陰道及直腸拭子。
   • 運輸與保存：多數樣本需立即送檢，延時需使用專用運輸培養基（如Amies培養基）。
2. • 革蘭染色：鏈狀排列的革蘭陽性球菌，可初步提示鏈球菌感染，但無法區分具體類型。
   • 臨床意義：快速輔助診斷，尤其在化膿性感染中結合臨床癥狀具有提示作用。
3. • 培養基選擇：
     • 血瓊脂平板（5%羊血）：觀察β溶血現象（完全溶血環）。
     • 選擇性培養基（如哥倫比亞CNA平板）：抑制革蘭陰性菌生長，提高分離率。
   • 培養條件：35-37℃、5% CO?環境，培養24-48小時。
   • 菌落特征：A群鏈球菌呈灰白色小菌落，透明溶血環；B群鏈球菌較大，溶血環較窄。
4. • 關鍵生化試驗：
     • A群鏈球菌：桿菌肽敏感試驗（敏感）、吡咯烷酮芳基酰胺酶（PYR）試驗（陽性）。
     • B群鏈球菌：CAMP試驗（陽性）、馬尿酸鹽水解試驗（陽性）。
     • 乳膠凝集試驗：通過群特異性抗原（如Lancefield分群）快速鑒定A、B、C、G群鏈球菌。
5. • 原理：通過免疫層析或乳膠凝集法檢測咽拭子中的A群鏈球菌抗原。
   • 優點：15-30分鐘出結果，適用于門診快速篩查。
   • 局限性：靈敏度較低（約80-90%），陰性結果需結合培養確認。
6. • PCR技術：檢測特異性基因（如A群鏈球菌的spy1258基因、B群鏈球菌的cfb基因）。
   • 多重PCR或實時熒光PCR：可同時鑒別多種病原體，適用于復雜感染或腦脊液等無菌部位樣本。
   • 全基因組測序（WGS）：用于暴發流行時的溯源分析。
7. • 抗鏈球菌溶血素O（ASO）抗體：提示近期A群鏈球菌感染（如風濕熱、腎小球腎炎的輔助診斷）。
   • 抗DNA酶B抗體：與ASO聯合檢測提高敏感性。
8. • 必要性：盡管β型溶血性鏈球菌對青霉素普遍敏感，但對大環內酯類耐藥率升高需監測。
   • 方法：CLSI推薦的微量肉湯稀釋法或E試驗，檢測紅霉素、克林霉素等藥物的敏感性。

二、不同感染場景的檢測策略

1. • 首選：快速抗原檢測（A群鏈球菌）結合培養（陰性抗原結果時）。
   • 注意：兒童患者需嚴格篩查以避免風濕熱風險。
2. • 產前篩查：孕35-37周陰道-直腸拭子培養或PCR檢測。
   • 確診：血/腦脊液培養+乳膠凝集分群。
3. • 血培養：需氧瓶+厭氧瓶聯合使用，縮短報陽時間。
   • 分子檢測：直接對血液樣本進行PCR檢測，加速診斷。
4. • 膿液培養：結合革蘭染色和生化鑒定，排除金黃色葡萄球菌混合感染。

三、結果解讀與臨床意義

• 陽性結果：
  • 直接指導抗生素選擇（如青霉素、頭孢菌素）。
  • B群鏈球菌陽性孕婦需產時預防性用藥。
• 陰性結果：
  • 排除鏈球菌感染時需結合臨床表現（如病毒性咽炎）。
• 耐藥性警示：紅霉素耐藥菌株需避免使用克林霉素（可能存在誘導耐藥）。

四、質量控制與注意事項

• 標本污染：避免口腔正常菌群干擾咽拭子結果。
• 溶血現象誤判：與其他β溶血菌（如某些葡萄球菌）鑒別需依賴生化或分子檢測。
• 分子檢測假陽性：注意引物特異性及交叉污染控制。

五、總結