一、檢測原理

二、樣本類型與采集

1. • 痰液：首選晨痰（深咳后采集），連續3天以提高檢出率。
   • 體液：胸腹水、腦脊液、關節液等（需離心濃縮）。
   • 組織活檢：淋巴結、肺組織等（需研磨處理）。
   • 尿液或糞便：用于疑似泌尿系統或腸道結核患者。
2. • 避免唾液或食物殘渣污染痰樣本。
   • 無菌操作采集體液樣本，防止雜菌干擾。

三、檢測流程

1. • 液化與消化：使用4% NaOH或N-乙酰-L-半胱氨酸（NALC）處理痰液，溶解粘蛋白并殺滅雜菌。
   • 離心濃縮：提高抗酸桿菌的檢出率。
2. • 齊-尼染色法：
     1. 初染：石碳酸復紅加熱染色5分鐘。
     2. 脫色：3%鹽酸乙醇脫色至無紅色流出。
     3. 復染：亞甲藍復染30秒，背景呈藍色。
   • 熒光染色法：金胺O染色后熒光顯微鏡觀察，靈敏度更高。
3. • 油鏡觀察（齊-尼法）：至少觀察100個視野，陽性標準為至少2條抗酸桿菌/300視野。
   • 熒光顯微鏡：篩查效率高，但需復核齊-尼染色確認。

四、結果判讀與報告

1. • 陰性：未發現抗酸桿菌。
   • 陽性分級：
     • 1+：1-9條/100視野。
     • 2+：10-99條/100視野。
     • 3+：≥100條/視野（單個視野可見多條）。
2. • 陽性結果需結合臨床表現，可能存在非結核分枝桿菌（NTM）感染。
   • 陰性結果不能完全排除結核?。ㄐ杞Y合培養或分子檢測）。

五、臨床意義

1. • 快速篩查：1-2小時內出結果，適用于結核病高負擔地區。
   • 傳染性評估：痰涂片陽性提示開放性結核，傳染性強。
2. • 靈敏度低：需≥10^4條菌/mL樣本方可檢出，漏檢率高。
   • 無法區分菌種：需結合培養、分子檢測（如GeneXpert MTB/RIF）確認是否為結核分枝桿菌。

六、質量控制

1. • 每批次染色需設陽性對照（已知抗酸桿菌涂片）和陰性對照。
   • 脫色時間嚴格控制，避免假陰性（脫色過度）或假陽性（脫色不足）。
2. • 顯微鏡操作需標準化，避免視野遺漏或誤判。

七、應用場景

1. 結核病防控：基層醫療機構初篩、流行病學監測。
2. 療效監測：抗結核治療過程中菌量變化的動態觀察。
3. 肺外結核輔助診斷：如結核性腦膜炎（腦脊液鏡檢）、骨結核（膿液鏡檢）。

八、總結