• 比色法：基于對硝基苯磷酸鹽（pNPP）在ALP催化下生成對硝基苯酚（pNP）的顯色反應，通過吸光度變化計算酶活性。
• 連續監測法：動態監測反應體系中產物的生成速率，更快速且靈敏度高，是目前主流方法。

(1) 總ALP活性檢測

• 定義：測定血清中所有ALP同工酶的總活性。
• 臨床意義：
  • 肝膽疾病：膽道梗阻（如膽結石、腫瘤）時ALP顯著升高（可達正常值的3-10倍），肝炎、肝硬化輕中度升高。
  • 骨骼疾病：骨軟化癥、Paget病、骨轉移癌等成骨細胞活躍疾病導致ALP升高。
  • 其他：妊娠期胎盤ALP升高（生理性），腸道疾病（如克羅恩病）可能導致腸型ALP升高。

(2) ALP同工酶分析

• 肝型ALP（ALP1、ALP2）：肝膽疾病時升高，常伴γ-谷氨酰轉肽酶（GGT）升高。
• 骨型ALP（ALP3）：骨骼疾病特異性標志物，見于骨腫瘤、佝僂病、骨折愈合期。
• 腸型ALP（ALP4）：餐后輕微升高，顯著升高提示腸道疾病或肝硬化。
• 胎盤型ALP（ALP5）：妊娠晚期升高，非妊娠期出現可能提示生殖系統腫瘤。

(3) 骨特異性堿性磷酸酶（BALP）

• 檢測意義：直接反映成骨細胞活性，用于：
  • 骨質疏松治療療效監測（如雙膦酸鹽類藥物治療后BALP降低）。
  • 兒童佝僂病、腎性骨營養不良的早期診斷。
  • 惡性腫瘤骨轉移的評估。

(4) 與其他指標的聯合檢測

• ALP/GGT比值：鑒別肝膽疾病（ALP與GGT同步升高）與骨骼疾病（ALP升高但GGT正常）。
• ALP與鈣、磷代謝指標：聯合血鈣、血磷、甲狀旁腺激素（PTH）評估代謝性骨病。

• 樣本類型：血清（首選）或肝素抗凝血漿，避免溶血和脂血干擾。
• 參考區間（成人，37℃連續監測法）：
  • 男性：40-130 U/L
  • 女性：35-105 U/L
  • 兒童：生長發育期ALP活性可高達成人3倍，需使用年齡特異性參考值。

• 生理性波動：餐后（腸型ALP）、妊娠晚期、青少年生長期ALP升高屬正常現象。
• 藥物影響：抗癲癇藥（苯妥英）、抗生素（紅霉素）可能誘導肝型ALP升高；激素替代治療影響骨代謝。
• 假性降低： EDTA抗凝劑會螯合ALP必需的鋅離子，導致結果偏低。

• 篩查：黃疸患者的肝膽梗阻評估。
• 診斷：結合影像學鑒別膽汁淤積性肝病與肝炎。
• 監測：跟蹤Paget病活動度或骨轉移癌治療效果。
• 預后：肝硬化患者ALP持續升高提示病情進展風險。