一、常用檢測方法

1. • 原理：基于氨基酸極性與色譜柱的相互作用實現分離，紫外/熒光檢測器定量。
   • 適用性：廣泛用于醫藥、食品中氨基酸的常規檢測，如酪氨酸、苯丙氨酸的定量分析。
   • 優勢：靈敏度高（μg/mL級），自動化程度高。
2. • 原理：結合色譜分離與質譜高特異性檢測，通過分子量及碎片離子定性定量。
   • 適用性：復雜樣本（如血漿）中低濃度氨基酸（如蛋氨酸、胱氨酸）的精準檢測。
   • 優勢：抗干擾能力強，檢測限可達ng/mL級。
3. • 原理：利用氨基酸電荷差異進行分離，柱后衍生化結合光度檢測。
   • 適用性：適用于含鹽量高的樣品（如發酵液），常用于蘇氨酸、賴氨酸檢測。
4. • 原理：依據電場下遷移速率差異分離，適配小樣本量檢測。
   • 適用性：科研領域快速分析氨基酸手性純度。

二、核心檢測項目

1. • 項目內容：確認目標氨基酸種類并測定濃度。
   • 關鍵指標：
     • L-胱氨酸：需檢測其二硫鍵穩定性（易氧化斷裂）。
     • L-酪氨酸：酚羥基易氧化，需評估光/熱儲存條件下的降解產物。
     • 甘氨酸：無手性中心，無需旋光分析。
2. • 雜質類型：有機雜質（如其他氨基酸）、無機鹽（如鹽酸賴氨酸中的Cl?）、水分等。
   • 典型方法：
     • L-鹽酸賴氨酸：離子色譜法測定Cl?含量（藥典要求≤0.05%）。
     • L-蛋氨酸：原子吸收法檢測硫元素含量（驗證純度≥98.5%）。
3. • 檢測對象：除甘氨酸外，其余L-型氨基酸需排除D-型異構體污染。
   • 方法：手性色譜柱（如Chirobiotic T）分離，確保光學純度≥99%。
4. • 熔點/比旋光度：如L-亮氨酸熔點＞293℃，比旋光度+14.5°~+16.0°（6mol/L HCl）。
   • 溶解度：驗證是否符合藥典標準（如L-纈氨酸水溶性約8.85g/100mL）。
5. • L-蛋氨酸：高溫下易分解生成甲硫醇，需加速試驗評估貨架期。
   • L-苯丙氨酸：光照敏感，檢測苯丙酮酸等降解產物。

三、應用領域與檢測意義

1. • 質量控制：注射級氨基酸需符合USP/ChP嚴格限值（如內毒素＜0.5EU/mg）。
   • 疾病診斷：血漿苯丙氨酸升高提示苯丙酮尿癥；尿胱氨酸結晶檢測輔助結石診斷。
2. • 配方優化：嬰幼兒奶粉中賴氨酸、蘇氨酸比例需符合FAO/WHO標準。
   • 真實性鑒別：HPLC指紋圖譜區分天然與合成氨基酸來源。
3. • 發酵監控：在線檢測L-天冬氨酸發酵液濃度，優化產率。
   • 材料合成：絲氨酸用于生物可降解材料，需控制聚合度相關雜質。

四、檢測流程與注意事項

1.  
2. • 樣品保存：-80℃凍存避免降解（尤其胱氨酸、酪氨酸）。
   • 衍生化選擇：鄰苯二甲醛（OPA）適于伯胺，脯氨酸需用茚三酮。
   • 質控措施：每批次插入加標回收實驗（回收率85%~115%）。

五、結語