二十碳五烯酸（EPA）檢測：核心檢測項目與方法解析

摘要

引言

核心檢測項目與意義

1. • 目的：確定樣品中EPA占總脂肪酸的百分比（純度）或絕對含量（mg/g）。
   • 方法：
     • GC-FID：脂肪酸甲酯化后分析，適用純度檢測（如魚油膠囊≥90%）。
     • HPLC-UV/LC-MS：直接測定游離EPA，避免衍生化誤差，靈敏度達0.1μg/mL。
   • 標準參考：ISO 12966-2（GC法），USP〈401〉（脂肪酸甲酯分析）。
2. • 關鍵指標：
     • 過氧化值（PV）：評估初期氧化，限值≤5 meq/kg（AOAC 965.33）。
     • 茴香胺值（AV）：檢測次級氧化產物，PV+AV≤20為合格。
     • 酸價（AV）：反映游離脂肪酸含量，需≤3 mg KOH/g（GB 5009.229）。
   • 加速試驗：60℃保存14天模擬長期氧化，評估貨架期。
3. • 應用：確認EPA在總脂肪酸中的比例（如魚油中EPA+DHA≥30%）。
   • 技術：GC-MS聯用可同時定量EPA、DHA等，區分順式/反式異構體。
4. • 重金屬：鉛（≤0.1 ppm，ICP-MS法）、汞（冷原子吸收法）、砷（氫化物發生-原子熒光法）。
   • 有機溶劑殘留：GC-ECD檢測己烷、乙醇等（符合ICH Q3C限值）。
   • 微生物污染：需滿足《中國藥典》無菌要求（需氧菌≤10³ CFU/g）。
5. • 體外抗炎實驗：通過LPS誘導巨噬細胞模型，檢測EPA對TNF-α、IL-6的抑制率。
   • 體內降血脂模型：高脂飼料喂養大鼠，評估血清甘油三酯下降幅度。

檢測方法技術解析

• 方法	靈敏度	前處理	適用場景
  GC-FID	高	需甲酯化	純度、脂肪酸組成分析
  HPLC-MS	超高	直接進樣	復雜基質中痕量EPA檢測

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應用領域與案例

• 醫藥領域：心血管患者血漿EPA水平監測（目標：EPA+DPA+DHA占紅細胞膜脂肪酸≥4%）。
• 保健品質量控制：批次檢測需符合《GB 26400-2011 ω-3脂肪酸原料要求》。
• 食品工業：嬰幼兒配方奶粉添加藻油EPA，需驗證EPA含量（≥10 mg/100g）及無溶劑殘留。

注意事項

1. 樣品保存：-80℃避光儲存，添加抗氧化劑（BHT）防止降解。
2. 方法驗證：需進行回收率（85-115%）、精密度（RSD<5%）及線性（R²>0.995）驗證。
3. 基質效應：血液樣品需SPE凈化，魚油需皂化提取以減少干擾。