生物負載檢測：核心檢測項目詳解

一、生物負載檢測的定義與重要性

• 評估生產過程的潔凈度：監控微生物污染風險。
• 驗證滅菌工藝有效性：如輻照或濕熱滅菌前需測定初始生物負載。
• 符合法規要求：遵循USP、EP、ISO等國際標準，確保產品放行合規。

二、核心檢測項目詳解

1. • 目的：量化樣品中需氧菌的總數，反映生產過程的微生物控制水平。
   • 方法：
     • 薄膜過濾法：適用于液體樣品，通過過濾后培養基培養。
     • 平皿法：直接接種于瓊脂平板，30-35°C培養3-5天。
   • 標準：根據產品類型不同，如注射劑通常限值為≤10 CFU/mL（USP <61>）。
   • 意義：直接關聯產品滅菌前的污染程度。
2. • 目的：檢測僅在無氧條件下生長的微生物（如梭菌屬）。
   • 方法：使用厭氧培養箱或厭氧袋，37°C培養5-7天。
   • 應用場景：植入式醫療器械或深部組織用藥需重點監測。
3. • 目的：評估真菌污染風險，尤其在潮濕環境中易滋生。
   • 方法：沙氏瓊脂培養基，20-25°C培養5-7天。
   • 標準：通常限值為≤10 CFU/樣品（ISO 11737-1）。
4. • 目標菌種：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、沙門氏菌等。
   • 方法：
     • 選擇性培養基：如麥康凱瓊脂分離腸道菌。
     • 分子生物學技術：PCR快速鑒定特定病原。
   • 法規要求：藥典明確致病菌不得檢出（如ChP 1105）。
5. • 監測對象：潔凈室空氣、設備表面、人員操作區。
   • 方法：
     • 沉降菌監測：暴露平皿法。
     • 接觸碟法：表面微生物采樣。
   • 標準：ISO 14698規定潔凈室分級（如A級區沉降菌≤1 CFU/4小時）。

三、檢測流程與關鍵控制點

1. 樣品處理：根據產品特性選擇中和劑（如含卵磷脂的培養基中和抑菌性樣品）。
2. 培養條件：嚴格控制溫度、時間及氣體環境。
3. 結果分析：統計菌落形成單位（CFU），對比標準限值。
4. 偏差處理：超標結果需啟動OOS調查，追溯污染源并改進工藝。

四、標準與技術創新

• 國際標準：USP <61>/<62>、ISO 11737-1（醫療器械）、EP 2.6.12。
• 快速檢測技術：ATP生物發光法可在數分鐘內獲結果，適用于在線監控。
• 趨勢分析：通過歷史數據預測污染風險，優化清潔消毒周期。

五、應用與展望

• 自動化檢測系統：減少人為誤差。
• 分子技術的普及：如宏基因組測序精準鑒定微生物群落。
• 標準統一化：促進跨國產品合規性互認。