豬用疫苗檢測：核心檢測項目解析

一、理化性質檢測

1. • 目的：觀察疫苗的色澤、澄清度及有無異物或沉淀。
   • 方法：目視或光學顯微鏡觀察。
   • 標準：液體疫苗應澄清無雜質；凍干疫苗呈疏松團塊，易溶解。
2. • 目的：確保疫苗的酸堿度適宜，避免對接種動物產生刺激。
   • 方法：使用pH計進行測定。
   • 標準：通常為6.8-7.8，具體依據疫苗類型調整。
3. • 目的：評估疫苗在不同儲存條件下的有效期。
   • 方法：加速破壞試驗（如高溫、反復凍融）后檢測活菌/病毒滴度或抗原活性。

二、安全性檢測

1. • 目的：檢測疫苗中是否存在非特異性毒性物質。
   • 方法：接種小鼠或豚鼠，觀察7天內是否出現死亡或中毒癥狀。
   • 標準：試驗動物應全部存活且無異常反應。
2. • 目的：評估疫苗中殘留的異源蛋白（如牛血清白蛋白）引發的過敏風險。
   • 方法：ELISA法檢測殘留量，或豚鼠主動過敏試驗。
3. • 目的：確保疫苗無細菌、真菌或支原體污染。
   • 方法：接種硫乙醇酸鹽培養基（厭氧菌）或胰蛋白酶大豆瓊脂（需氧菌），培養14天觀察；支原體檢測采用PCR或培養法。

三、效力檢測（效價評估）

1. • 方法：
     • 血清學檢測：通過ELISA、病毒中和試驗（VNT）測量免疫后抗體水平。
     • 細胞免疫檢測：如IFN-γ釋放試驗評估T細胞應答。
   • 標準：抗體滴度需達到保護閾值（如口蹄疫疫苗中和抗體≥1:64）。
2. • 目的：直接驗證疫苗對強毒株攻擊的保護效果。
   • 方法：免疫動物后接種活毒，觀察發病率及死亡率。
   • 適用類型：活疫苗或滅活疫苗的關鍵效力驗證。
3. • 方法：SDS-PAGE電泳、高效液相色譜（HPLC）或定量PCR（針對核酸疫苗）。

四、微生物學檢測

1. • 重點：非洲豬瘟病毒（ASFV）、豬圓環病毒（PCV）等潛在污染物。
   • 方法：PCR、高通量測序（NGS）或細胞培養法。
2. • 目的：確認病原體已完全滅活，無復制能力。
   • 方法：接種敏感細胞連續傳代3代，無病變則為合格。

五、其他專項檢測

1. • 項目：粒徑分布（如納米佐劑）、重金屬殘留（如鋁佐劑）。
2. • 目的：確認疫苗毒株與標稱一致。
   • 方法：基因測序、單克隆抗體中和試驗。
3. • 重點：抗生素（如生產過程中使用的慶大霉素）、細胞基質殘留（如Vero細胞DNA）。

六、檢測標準與法規依據

• 中國標準：《中華人民共和國獸藥典》《獸用生物制品質量標準》。
• 國際參考：世界動物衛生組織（OIE）《Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals》。

七、挑戰與趨勢

1. 新技術應用：mRNA疫苗需增加脂質納米顆粒包封率檢測；類器官模型替代部分動物試驗。
2. 標準化難題：不同毒株的攻毒試驗缺乏統一評判標準。