α﹣淀粉酶測(cè)定試劑(盒)(連續(xù)檢測(cè)法)檢測(cè)
發(fā)布時(shí)間:2025-05-24 18:10:33- 點(diǎn)擊數(shù): - 關(guān)鍵詞:
實(shí)驗(yàn)室擁有眾多大型儀器及各類分析檢測(cè)設(shè)備,研究所長(zhǎng)期與各大企業(yè)、高校和科研院所保持合作伙伴關(guān)系,始終以科學(xué)研究為首任,以客戶為中心,不斷提高自身綜合檢測(cè)能力和水平,致力于成為全國(guó)科學(xué)材料研發(fā)領(lǐng)域服務(wù)平臺(tái)。
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- 底物:4,6-亞乙基-對(duì)硝基苯基-α-D-麥芽七糖苷(EPS-G7)。
- 反應(yīng)機(jī)制:α-淀粉酶水解EPS-G7生成對(duì)硝基苯酚(CNP),在405 nm波長(zhǎng)下吸光度升高,速率與酶活性成正比。
- 偶聯(lián)反應(yīng):部分試劑盒引入α-葡萄糖苷酶加速反應(yīng),確保產(chǎn)物線性釋放。
- 反應(yīng)緩沖液:維持最適pH(通常6.8-7.2)。
- CNP標(biāo)記底物:特異性被α-淀粉酶識(shí)別。
- 標(biāo)準(zhǔn)品/校準(zhǔn)品:用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
- 質(zhì)控品:監(jiān)控檢測(cè)系統(tǒng)穩(wěn)定性。
- 樣本準(zhǔn)備:血清或肝素抗凝血漿(避免溶血、脂血干擾)。
- 加樣與混合:樣本與試劑按比例混合,37℃恒溫。
- 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè):在405 nm波長(zhǎng)下連續(xù)監(jiān)測(cè)吸光度變化(通常2-3分鐘)。
- 計(jì)算活性:根據(jù)ΔA/min計(jì)算酶活性(U/L)。
- 急性胰腺炎:發(fā)病后2-12小時(shí)血清α-淀粉酶顯著升高(>3倍參考值上限)。
- 慢性胰腺炎:活性正常或輕度升高。
- 腮腺炎:唾液型α-淀粉酶升高為主。
- 其他:腸梗阻、腎功能不全、藥物(如嗎啡)影響。 注意:尿液α-淀粉酶檢測(cè)延長(zhǎng)診斷窗口期(升高持續(xù)72小時(shí)以上)。
- 樣本干擾:溶血(釋放腺體酶)、乳糜血(濁度干擾)需重新采樣。
- 藥物影響:糖皮質(zhì)激素、避孕藥可能導(dǎo)致假性升高。
- 操作規(guī)范:嚴(yán)格控制溫度和反應(yīng)時(shí)間,避免底物降解。
- 參考范圍:成人血清通常28-100 U/L(因方法而異),需遵循試劑說(shuō)明書。
- 室內(nèi)質(zhì)控:每日運(yùn)行高、低值質(zhì)控品,監(jiān)控精密度。
- 室間質(zhì)評(píng):參與實(shí)驗(yàn)室間比對(duì),確保結(jié)果一致性。
- 校準(zhǔn)頻率:根據(jù)試劑穩(wěn)定性定期校準(zhǔn),建議每批次更換校準(zhǔn)。
方法 | 原理 | 優(yōu)點(diǎn) | 局限性 |
---|---|---|---|
連續(xù)檢測(cè)法 | 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CNP釋放速率 | 高靈敏度、寬線性范圍 | 需精密儀器 |
終點(diǎn)法 | 反應(yīng)終止后測(cè)量產(chǎn)物總量 | 操作簡(jiǎn)單 | 易受底物耗盡影響 |
碘-淀粉法 | 淀粉水解后與碘顯色 | 成本低 | 靈敏度低、步驟繁瑣 |
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