結(jié)核病ELISA檢測：原理與應(yīng)用概述

結(jié)核病（Tuberculosis, TB）是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis）引起的慢性傳染病，主要侵犯肺部，也可累及其他器官。早期診斷是控制結(jié)核病傳播和提高治愈率的關(guān)鍵。ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）作為一種高靈敏度的免疫學(xué)檢測技術(shù)，在結(jié)核病血清學(xué)診斷中具有重要價值。其通過檢測患者血清中的特異性抗體或抗原，為臨床提供輔助診斷依據(jù)，尤其適用于痰涂片陰性或難以獲取樣本的病例。

檢測項(xiàng)目

結(jié)核病ELISA檢測的核心項(xiàng)目包括：
1. 抗結(jié)核抗體檢測：如IgG、IgM抗體，反映機(jī)體對結(jié)核桿菌的免疫應(yīng)答；
2. 特異性抗原檢測：如ESAT-6、CFP-10等結(jié)核分枝桿菌分泌蛋白；
3. 細(xì)胞因子檢測：如γ-干擾素（IFN-γ）釋放試驗(yàn)相關(guān)指標(biāo)。

檢測儀器

ELISA檢測需配備以下核心設(shè)備：
- 酶標(biāo)儀（微孔板讀數(shù)儀）：用于測量反應(yīng)后的吸光度值；
- 洗板機(jī)：完成反應(yīng)孔的清洗步驟；
- 恒溫孵育箱：控制抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)溫度；
- 移液器及加樣系統(tǒng)：確保試劑精準(zhǔn)分配。

檢測方法

結(jié)核病ELISA采用雙抗體夾心法或間接法，標(biāo)準(zhǔn)流程包括：
1. 固相包被：將結(jié)核特異性抗原或抗體固定于微孔板；
2. 樣本孵育：加入待測血清，37℃孵育形成免疫復(fù)合物；
3. 酶標(biāo)記物結(jié)合：加入酶標(biāo)二抗進(jìn)行信號放大；
4. 顯色與終止：底物TMB顯色后通過終止液固定反應(yīng)；
5. 結(jié)果判讀：通過吸光度值計算臨界值（Cut-off值），判斷陰陽性。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

結(jié)核病ELISA檢測需遵循以下標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范：
- 國際標(biāo)準(zhǔn)：WHO《結(jié)核病診斷操作指南》推薦的敏感度（≥80%）和特異度（≥95%）要求；
- 國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)：GB/T 14926.50-2021《實(shí)驗(yàn)動物 結(jié)核分枝桿菌檢測方法》及WS 288-2017《肺結(jié)核診斷》；
- 質(zhì)量控制：每批次實(shí)驗(yàn)需設(shè)置陽性對照、陰性對照和空白對照，確保檢測體系穩(wěn)定性。

值得注意的是，ELISA結(jié)果需結(jié)合臨床癥狀、影像學(xué)檢查和其他實(shí)驗(yàn)室檢測（如GeneXpert、痰培養(yǎng)）進(jìn)行綜合判斷，以避免假陽性或假陰性結(jié)果對臨床決策的干擾。