傳染性造血器官壞死病（IHN）檢疫檢測概述

傳染性造血器官壞死病（Infectious Hematopoietic Necrosis, IHN）是由傳染性造血器官壞死病毒（IHNV）引發的一種高度傳染性魚類疾病，主要危害鮭科魚類（如虹鱒、大西洋鮭等），可導致幼魚死亡率高達90%以上。該病被世界動物衛生組織（WOAH）列為須申報的水生動物疫病，對水產養殖業構成重大威脅。檢疫檢測是防控IHN傳播的核心手段，通過早期發現、精準診斷和嚴格管控，可有效阻斷病毒擴散，保護養殖產業安全。

主要檢測項目

IHN的檢疫檢測涵蓋臨床癥狀觀察、病原學檢測和分子生物學分析三大方向：
1. 臨床癥狀檢測：觀察魚體是否出現體色發黑、腹部膨大、眼球突出、鰓絲蒼白及內臟出血等典型癥狀。
2. 病毒分離培養：采集病魚腎臟、脾臟等組織樣本，接種敏感細胞系（如EPC、CHSE-214細胞）進行病毒培養。
3. 分子生物學檢測：采用RT-PCR、實時熒光定量PCR（qPCR）或逆轉錄環介導等溫擴增（RT-LAMP）技術檢測病毒核酸。
4. 血清學檢測：通過酶聯免疫吸附試驗（ELISA）或免疫熒光抗體試驗（IFAT）檢測特異性抗體。

常用檢測儀器

檢測過程中需使用多種專業儀器設備：
- PCR儀（常規/實時熒光型）
- 核酸提取儀
- 凝膠成像系統
- 生物安全柜
- 倒置熒光顯微鏡
- 恒溫培養箱（用于細胞培養）
- 高速離心機
- 酶標儀（ELISA檢測用）

核心檢測方法

1. RT-PCR檢測法：
提取樣本RNA后，使用特異性引物（如針對病毒G蛋白基因的引物組）進行逆轉錄PCR擴增，通過電泳分析產物條帶判定結果。
2. 細胞培養法：
將組織勻漿液接種敏感細胞系，觀察3-7天內是否出現細胞病變效應（CPE），結合免疫熒光染色確認病毒存在。
3. 實時熒光定量PCR：
采用TaqMan探針技術，可在2小時內完成病毒核酸的定量檢測，靈敏度達10-100拷貝/反應。

檢測標準依據

IHN檢測需嚴格遵循國際及國家技術規范：
- 《WOAH陸生和水生動物診斷試驗手冊》（2023版）第3.1.2章
- GB/T 15805.3-2018《魚類檢疫方法 第3部分：傳染性造血器官壞死病毒(IHNV)》
- SN/T 1675-2019《傳染性造血器官壞死病檢疫技術規范》
- ISO/TS 15216-2:2019《食物鏈微生物學-病毒檢測方法》相關要求

質量控制要點

檢測過程需實施嚴格質控：
- 設置陽性對照（IHNV標準毒株）和陰性對照（無核酸水）
- 定期驗證檢測試劑的靈敏度和特異性
- 實驗環境符合生物安全二級（BSL-2）標準
- 操作人員需通過專業生物安全培訓