傳染性皮下和造血器官壞死檢疫檢測概述

傳染性皮下和造血器官壞死病（Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis, IHHN）是一種由傳染性皮下和造血器官壞死病毒（IHHNV）引起的甲殼類動物疾病，主要影響對蝦、龍蝦等經濟性水產品種。該病具有高度傳染性，可導致幼體高死亡率、成體生長遲緩及畸形等問題，對水產養殖業造成重大經濟損失。隨著國際貿易的頻繁化，IHHNV的跨境傳播風險日益增加，因此開展精準的檢疫檢測對保障養殖安全、維護生態平衡及食品安全至關重要。

IHHN檢疫檢測的核心目標是通過科學手段快速識別病原，阻斷傳播鏈。檢測過程需結合臨床癥狀觀察、實驗室分析及分子生物學技術，覆蓋病毒篩查、毒力評估及流行病學追蹤等多個維度。以下從檢測項目、儀器、方法及標準四個層面展開詳細闡述。

檢測項目

IHHN檢疫檢測的主要項目包括：
1. 臨床癥狀檢測：觀察甲殼類動物是否出現體色異常（如白化）、甲殼軟化、附肢畸形等典型病變；
2. 組織病理學檢測：通過組織切片觀察皮下組織、造血器官及表皮細胞的壞死特征；
3. 病原學檢測：分離并鑒定IHHNV病毒顆粒；
4. 分子生物學檢測：針對病毒核酸（DNA或RNA）的定性或定量分析。

檢測儀器

檢測過程中需依賴以下關鍵儀器：
1. PCR擴增儀：用于核酸擴增，適用于病毒基因片段檢測；
2. 熒光定量PCR儀（qPCR）：實現病毒載量的實時定量分析；
3. 電泳儀及凝膠成像系統：用于核酸擴增產物的分離與可視化；
4. 透射電子顯微鏡（TEM）：直接觀察病毒顆粒形態；
5. 組織切片機與顯微鏡：輔助病理學分析。

檢測方法

IHHN檢測方法分為以下三類：
1. 分子生物學法：
- 常規PCR：基于IHHNV特異性引物（如389F/389R）擴增目標基因；
- 巢式PCR：提高檢測靈敏度，適用于低病毒載量樣本；
- 實時熒光定量PCR：結合探針技術實現快速定量；
2. 組織病理學法：通過H&E染色觀察感染組織的細胞核固縮、胞質空泡化等特征；
3. 免疫學方法：利用單克隆抗體進行病毒抗原的ELISA或免疫熒光檢測。

檢測標準

IHHN檢疫檢測需遵循以下國內外標準：
1. 國際標準：
- OIE《水生動物衛生法典》：規定IHHN的采樣、檢測流程及結果判定標準；
- ISO/TS 15216-1:2017：提供分子檢測方法的標準化指南；
2. 國內標準：
- GB/T 36193-2018《對蝦傳染性皮下和造血器官壞死病診斷技術》：明確PCR及病理學檢測的操作規范；
- SN/T 1151.6-2015《進出境水生動物檢疫規程》：涵蓋IHHN的檢疫要求及處置措施。

通過上述多維度的檢測體系，可有效防控IHHNV的傳播，為水產養殖業健康發展提供技術保障。檢測機構需定期更新技術設備、優化流程，并嚴格遵循標準化操作，以確保檢測結果的準確性與可靠性。