熒光光度計檢測的原理與應用范圍

熒光光度計是一種基于物質熒光特性進行定量和定性分析的高靈敏度儀器，其工作原理是通過激發光源（如氙燈或LED）發射特定波長的光照射樣品，使樣品中的熒光物質吸收能量后躍遷至激發態，隨后釋放能量返回基態并發射特征熒光。通過檢測熒光強度和波長分布，可實現對目標物質的分析。相比傳統分光光度法，熒光分析具有靈敏度高（可達ppb級）、選擇性好、干擾少等顯著優勢，廣泛應用于生物醫藥、環境監測、食品安全及材料科學等領域。

熒光光度計的核心檢測項目

1. 生物醫藥領域的熒光定量分析

在生物研究中，熒光光度計常用于DNA/RNA定量（如SYBR Green染料法）、蛋白質濃度測定（BCA法）、酶活性分析及藥物代謝產物檢測。例如，通過熒光標記技術可追蹤細胞內鈣離子濃度變化，靈敏度達到10^-9 mol/L。

2. 環境污染物檢測

針對多環芳烴（PAHs）、重金屬離子（如Hg²⁺、Pb²⁺）等有毒物質，熒光法能快速識別痕量污染物。水中苯并[a]芘的檢測限可低至0.1 μg/L，配合固相萃取技術可實現復雜基質中的精準分析。

3. 食品添加劑與毒素篩查

食品中黃曲霉毒素B1、維生素B2等成分可通過熒光特征峰進行定量。采用同步熒光掃描技術可同時測定多種添加劑，例如在植物油中鑒別非法添加的羅丹明B染料，檢測靈敏度達0.05 mg/kg。

4. 納米材料熒光特性表征

量子點、碳點等納米材料的熒光量子產率、激發發射光譜及穩定性測試需依賴熒光光度計。通過三維熒光光譜可解析CdSe量子點的粒徑分布，誤差范圍控制在±0.5 nm以內。

特殊檢測模式與擴展功能

現代熒光光度計集成多種高級功能： ? 時間分辨熒光：通過微秒級時間門控技術消除背景干擾，用于鑭系元素標記檢測 ? 低溫熒光檢測：配置液氮低溫附件可研究磷光特性，拓展至77K低溫分析 ? 偏振熒光分析：測定熒光各向異性，解析大分子構象變化和相互作用

檢測過程的關鍵控制點

為保證檢測準確性需關注： 1) 樣品前處理中避免引入熒光淬滅劑 2) 激發/發射狹縫寬度優化（通常1-5 nm） 3) 定期使用硫酸奎寧標準品校準儀器 4) 嚴格控制樣品溫度（±0.5℃）以保持熒光穩定性