尿素測定試劑盒（酶偶聯監測法）的檢測原理與應用

尿素是人體蛋白質代謝的終產物之一，主要通過腎臟排出體外。血液中尿素水平的檢測是評估腎功能和蛋白質代謝狀態的重要指標，在臨床診斷中廣泛應用于急/慢性腎衰竭、脫水、肝病等疾病的輔助診斷及病情監測。尿素測定試劑盒（酶偶聯監測法）作為一種高效、特異性的檢測工具，通過酶促反應與比色分析的結合，能夠快速、準確地測定血清或血漿中尿素的濃度。其核心優勢在于靈敏度高、抗干擾能力強，可適應自動化分析儀器的需求，成為現代醫學實驗室中尿素檢測的主流方法。

檢測原理

酶偶聯監測法基于尿素酶（Urease）與谷氨酸脫氫酶（GLDH）的級聯反應： 1. **尿素水解**：尿素酶催化尿素分解為氨（NH?）和二氧化碳（CO?）。 2. **氨的轉化**：氨與α-酮戊二酸在谷氨酸脫氫酶作用下，消耗NADH生成谷氨酸，同時NADH被氧化為NAD?。 3. **吸光度測定**：通過監測340nm波長下NADH的吸光度下降速率，計算尿素濃度。 該方法通過兩步酶促反應放大信號，顯著提升了檢測靈敏度和特異性。

臨床應用價值

尿素檢測在以下場景中具有重要臨床意義： 1. **腎功能評估**：與肌酐聯合檢測可區分腎前性、腎性及腎后性氮質血癥。 2. **脫水狀態判斷**：脫水導致的腎血流量減少會引起尿素水平升高。 3. **肝病輔助診斷**：嚴重肝病時尿素合成減少，血尿素濃度可能降低。 4. **胃腸道出血監測**：腸道蛋白質吸收增加可引起尿素水平上升。

檢測流程關鍵步驟

使用該試劑盒時需嚴格遵循標準化操作： 1. **樣本準備**：采用血清或肝素抗凝血漿，避免溶血（血紅蛋白>5g/L會干擾結果）。 2. **試劑復溶**：按說明書用去離子水配制工作液，避免反復凍融。 3. **反應條件控制**：溫度（37℃±0.5℃）、時間（5-10分鐘）需精確控制。 4. **校準與質控**：每日使用配套校準品校準，并運行三個水平質控品（正常值、病理高值、低值）。

結果解讀與注意事項

**參考范圍**：成人血清尿素2.8-7.1mmol/L（方法及儀器差異需參考實驗室本地標準）。 **異常值解析**： - **升高**：急慢性腎衰、脫水、高蛋白飲食、胃腸道出血 - **降低**：低蛋白攝入、嚴重肝病、妊娠后期 **干擾因素**： - 高濃度氟化鈉（>5mg/dL）抑制尿素酶活性 - 溶血樣本中紅細胞釋放的氨會導致假性升高 - 脂血樣本需高速離心處理 **質量控制**：建議采用Westgard規則進行室內質控分析，參與室間質評確保檢測準確性。