γ-谷氨酰基轉移酶測定試劑（盒）（GPNA底物法）的臨床意義與檢測原理

γ-谷氨酰基轉移酶（γ-GT或GGT）是一種廣泛存在于人體組織中的酶，尤其在肝臟、腎臟和胰腺中活性較高。臨床上，γ-GT檢測是評估肝膽系統疾病的重要指標之一，如酒精性肝病、膽汁淤積、肝炎和膽道梗阻等。此外，γ-GT水平升高也與心血管疾病、糖尿病等代謝性疾病相關。GPNA（L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺）底物法是目前實驗室中常用的γ-GT檢測方法，其原理基于γ-GT催化底物GPNA與受體分子（如甘氨酰甘氨酸）的轉移反應，通過比色法測定酶活性。

檢測原理與試劑組成

GPNA底物法的核心反應為：在γ-GT催化下，GPNA的γ-谷氨酰基轉移至受體甘氨酰甘氨酸，生成游離的5-氨基-2-硝基苯甲酸（ANB）。ANB在405 nm波長處具有最大吸光度，通過測定吸光度變化速率可計算γ-GT活性。試劑盒通常包含以下組分：底物緩沖液（含GPNA和甘氨酰甘氨酸）、校準品、質控品及反應終止液。部分試劑盒還會添加穩定劑和防腐劑以提高試劑的穩定性和準確性。

操作步驟與注意事項

檢測過程主要包括樣本預處理、試劑混合、孵育及吸光度測定。具體步驟為：將血清樣本與底物緩沖液按比例混合，37℃孵育一定時間后加入終止液，隨后用分光光度計讀取吸光度值。操作中需注意：①避免溶血或脂血樣本干擾；②嚴格控制反應溫度和時間以保障重復性；③定期校準儀器并同步檢測質控品。此外，某些藥物（如苯妥英、巴比妥類）可能影響γ-GT活性，需在檢測前充分了解患者用藥史。

結果解讀與臨床價值

健康成人γ-GT參考范圍通常為男性10-60 U/L，女性7-45 U/L。顯著升高（>正常上限5倍）常見于膽道梗阻、原發性肝癌或酒精性肝病；輕度升高可能與脂肪肝、藥物性肝損傷或慢性肝炎相關。值得注意的是，γ-GT對酒精攝入高度敏感，結合其他肝功能指標（如ALT、ALP）可提高診斷特異性。GPNA底物法因其靈敏度高、線性范圍寬（可達1000 U/L以上），適合自動化分析平臺，廣泛應用于體檢篩查和疾病監測。

質量控制與局限性

為確保檢測準確性，實驗室需遵循以下質控措施：①使用配套校準品建立標準曲線；②每日運行高、低值質控品；③定期參加室間質評。GPNA法的局限性在于可能受到高膽紅素或溶血樣本的干擾，需通過樣本前處理或試劑改良（如添加抗干擾成分）降低影響。對于極高水平樣本，需稀釋后復測以避免“鉤狀效應”。此外，不同試劑廠商的參考區間可能存在差異，實驗室應建立本地化的參考范圍。